Proteintrennung und -reinigung in der Gentechnik-Werkstatt

Proteintrennung und -reinigung in der Gentechnik-Werkstatt

Die Proteintrennung und -reinigung ist die Kerntechnologie in der biologischen Industrie und ein wichtiges Bindeglied in der pharmazeutischen Industrie der Gentechnik-Werkstätten. Die Grundprinzipien der Trennung und Reinigung rekombinanter Proteine ​​sind Einfangen, Rohreinigung und Reinigung. Der allgemeine Prozess der Trennung und Reinigung ist: Zunächst wird das biologische Material vor...

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Proteinisolierung und -reinigung in der Gentechnik-Werkstatt

Die Proteintrennung und -reinigung ist die Kerntechnologie in der biologischen Industrie und ein wichtiges Bindeglied in der pharmazeutischen Industrie der Gentechnik-Werkstätten. Die Grundprinzipien der Trennung und Reinigung rekombinanter Proteine ​​sind Einfangen, Rohreinigung und Reinigung. Der allgemeine Prozess der Trennung und Reinigung ist: Zuerst wird das biologische Material vorverarbeitet, um das rekombinante Protein von den Zellen zu trennen, und dann wird entsprechend den Eigenschaften des zu reinigenden Proteins, z. B. dem isoelektrischen Punkt, eine geeignete Trennungs- und Reinigungmethode ausgewählt des Proteins, Löslichkeit in verschiedenen Salzlösungen usw. Für Immobilien kann die Niederschlagstrennungsmethode eingesetzt werden; Die Membrantrenntechnologie kann je nach Proteinmolekulargewicht eingesetzt werden. Ionenaustauschchromatographie, Molekularsiebchromatographie, hydrophobe Schicht kann nach Ladungsunterschied, Molekülgröße, Hydrophobizität und Spezifität der Affinität zu anderen Biomolekülen ausgewählt werden. Chromatographie und Chromatographie.

Bei der Vorbehandlung von Proteinproben umfasst der Vorbehandlungsprozess im Allgemeinen die Trennung oder Anreicherung von Zellen oder Bakterien, und es werden Methoden der Zentrifugation und Filtration verwendet, die den Zustand der Fermentationsbrühe und der Kulturbrühe erfordern, um die Fest-Flüssigkeits-Trennung zu verbessern. Geschwindigkeit; Die Vorbehandlung der Fermentationsbrühe oder Kulturbrühe gentechnisch veränderter Stämme und Zellen besteht darin, die Viskosität der Lösung durch Anpassung des pH-Werts, Erhitzen und andere Behandlungen zu verringern, unter der Voraussetzung, die Stabilität der biologischen Aktivität des Proteins sicherzustellen und die Eigenschaften zu verändern die Lösung und den Staat für Folgemaßnahmen förderlicher machen. Einige der von gentechnisch veränderten Stämmen und Zellen exprimierten Produkte können außerhalb der Zellen abgesondert werden, die meisten davon existieren jedoch in den Zellen. Erst nachdem die Zellen aufgebrochen sind, können die in den Zellen enthaltenen Produkte in größtmöglichem Umfang zur weiteren Extraktion in die flüssige Phase abgegeben werden. Zu den Methoden der Zellfragmentierung gehören die mechanische Fragmentierung und die nicht-mechanische Fragmentierung. Bei der nichtmechanischen Fragmentierungsmethode werden hauptsächlich physikalische Faktoren und biochemische Substanzen zum Aufbrechen von Zellen verwendet, darunter hauptsächlich die Gefrier-Tau-Methode, die chemische Lysemethode, die enzymatische Hydrolysemethode usw.; Mechanische Fragmentierungsmethode: Sie nutzt hauptsächlich die mechanische Kraft der flüssigen und festen Phase, um die Zellen aufzubrechen. Das Homogenat enthält nach der Zellfragmentierung eine große Menge an Zelltrümmern, die vor der weiteren Extraktion und Trennung abgetrennt werden müssen. Derzeit werden hauptsächlich Methoden wie Filtration, Zentrifugation und Extraktion der wässrigen Phase verwendet. Zhongjing Global Purification kann Beratung, Planung, Design, Bau, Installation, Transformation und andere unterstützende Dienstleistungen für Reinraumwerkstätten und Reinraumwerkstätten für Gentechnik anbieten.

Die Membrantrenntechnologie ist eine Betriebstechnologie zur Flüssigkeitstrennung, die durch Polymertrennmembranen repräsentiert wird. Da die Membrantrenntechnologie viele Vorteile bietet, die andere Trenntechnologien nicht bieten: Die Konzentration erfordert keinen Phasenwechsel, der Trennkoeffizient ist groß, die Trennselektivität ist hoch und es sind keine Verdampfer- oder Kühlgeräte erforderlich, niedrige Investitionskosten und geringer Energieverbrauch; Die Membrantrenntechnologie hat viele Vorteile und ist wichtig und wird häufig in der Bio- und Lebensmittelindustrie, der Umwelttechnik, der Pharmaindustrie und vielen anderen Bereichen eingesetzt. Die Membrantrenntechnik nutzt eine semipermeable Membran als selektive Barriereschicht. Auf beiden Seiten der Membran gibt es einen gewissen Energieunterschied als treibende Kraft, der es einigen Komponenten ermöglicht, durchzugehen, während andere Komponenten in der Mischung zurückgehalten werden, und die Wanderung jeder Komponente durch die Membran ermöglicht. Es handelt sich um eine Technologie, die den Zweck der Trennung mit unterschiedlichen Geschwindigkeiten erreicht; Die Membran ist ein Material mit selektiver Trennfunktion, und die selektive Trennung der Membran wird verwendet, um die Trennung, Reinigung und Konzentration verschiedener Komponenten der Speiseflüssigkeit zu erreichen. Der Unterschied zur herkömmlichen Filtration besteht darin, dass die Membrantrennung im molekularen Bereich durchgeführt werden kann und dieser Prozess ein physikalischer Prozess ist, der keinen Phasenwechsel und die Zugabe von Zusatzstoffen erfordert. Die Porengröße der Membran beträgt im Allgemeinen Mikrometer. Ultrafiltrationsmembranen, Nanofiltrationsmembranen und Umkehrosmosemembranen; Je nach Material können sie in anorganische Membranen und organische Membranen unterteilt werden. Anorganische Membranen sind hauptsächlich Keramikmembranen und Metallmembranen, die eine geringe Filtrationsgenauigkeit und geringe Selektivität aufweisen.

Ultrafiltration ist ein Membranverfahren zwischen Mikrofiltration und Nanofiltration. Die Porengröße der Membran liegt zwischen 0,05 und 1000 μm. Ultrafiltration ist eine Membrantrenntechnologie, mit der Lösungen gereinigt, getrennt und konzentriert werden können. Der Druckunterschied auf beiden Seiten der Membran ist die treibende Kraft und die Ultrafiltrationsmembran wird als Filtermedium verwendet. Wenn Wasser unter einem bestimmten Druck durch die Oberfläche der Membran fließt, dürfen nur Wasser und kleine molekulare Substanzen, die kleiner als die Porengröße der Membran sind, durch, um die Reinigung der Lösung sowie Trennungs- und Konzentrationszwecke zu erreichen. Die Mikrofiltration gehört zur Präzisionsfiltration. Das Grundprinzip ist das Siebtrennverfahren. Der Anwendungsbereich der Mikrofiltrationsmembran besteht hauptsächlich darin, Partikel, Bakterien und andere Schadstoffe aus der Gasphase und der Flüssigphase abzufangen, um den Zweck der Reinigung, Trennung und Konzentration zu erreichen. Nanofiltration ist eine Membrantrenntechnologie zwischen Ultrafiltration und Umkehrosmose. Sein Molekulargewichtsgrenzwert liegt im Bereich von 80–1000 Da und die Porengröße beträgt mehrere Nanometer. Aufgrund der Überlegenheit der Nanofiltrations-Trenntechnologie wird sie häufig in der Biochemie, Pharmazie, Lebensmittelindustrie und vielen anderen Bereichen eingesetzt und bietet breite Anwendungsaussichten.

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