Taller de separación y purificación de proteínas en ingeniería genética.

Taller de separación y purificación de proteínas en ingeniería genética.

La separación y purificación de proteínas es la tecnología central de la industria biológica y un vínculo importante en la industria farmacéutica de los talleres de ingeniería genética; Los principios básicos de separación y purificación de proteínas recombinantes son captura, purificación en bruto y purificación. El proceso general de separación y purificación es: En primer lugar, el material biológico se pre...

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Taller de aislamiento y purificación de proteínas en ingeniería genética.

La separación y purificación de proteínas es la tecnología central de la industria biológica y un vínculo importante en la industria farmacéutica de los talleres de ingeniería genética; Los principios básicos de separación y purificación de proteínas recombinantes son captura, purificación en bruto y purificación. El proceso general de separación y purificación es: primero preprocesar el material biológico para separar la proteína recombinante de las células y luego seleccionar un método de separación y purificación apropiado de acuerdo con las propiedades de la proteína a purificar, como el punto isoeléctrico. de la proteína, solubilidad en diferentes soluciones salinas, etc. El método de separación por precipitación se puede utilizar para las propiedades; la tecnología de separación por membrana se puede utilizar según el peso molecular de la proteína; La cromatografía de intercambio iónico, la cromatografía de tamiz molecular, la capa hidrofóbica se pueden seleccionar según la diferencia de carga, el tamaño molecular, la hidrofobicidad y la especificidad de afinidad con otras biomoléculas. Cromatografía y cromatografía.

Pretratamiento de muestras de proteínas, el proceso de pretratamiento generalmente implica la separación o enriquecimiento de células o bacterias, y se utilizan los métodos de centrifugación y filtración, lo que requiere el estado del caldo de fermentación y del caldo de cultivo para mejorar la separación sólido-líquido. Velocidad; El pretratamiento del caldo de fermentación o caldo de cultivo de cepas y células genéticamente modificadas consiste en reducir la viscosidad de la solución mediante ajuste de PH, calentamiento y otros tratamientos bajo la premisa de asegurar la estabilidad de la actividad biológica de la proteína, cambiando las propiedades de la solución y hacer que el Estado sea más propicio para la adopción de medidas de seguimiento. Algunos de los productos expresados ​​por cepas y células genéticamente modificadas pueden secretarse fuera de las células, pero la mayoría de ellos existen en las células. Sólo después de que las células se hayan roto, los productos contenidos en las células podrán liberarse en la mayor medida posible a la fase líquida para su posterior extracción. Los métodos de fragmentación celular incluyen el método de fragmentación mecánica y el método de fragmentación no mecánica; el método de fragmentación no mecánica utiliza principalmente factores físicos y sustancias bioquímicas para romper las células, incluido principalmente el método de congelación y descongelación, el método de lisis química, el método de hidrólisis enzimática, etc.; método de fragmentación mecánica Utiliza principalmente la fuerza mecánica de las fases líquida y sólida para romper las células. El homogeneizado después de la fragmentación celular contiene una gran cantidad de restos celulares, que deben separarse antes de una mayor extracción y separación. En la actualidad se utilizan principalmente métodos como la filtración, centrifugación y extracción en fase acuosa. Zhongjing Global Purification puede proporcionar consultoría, planificación, diseño, construcción, instalación, transformación y otros servicios de apoyo para talleres limpios y talleres limpios de ingeniería genética.

La tecnología de separación por membranas es una tecnología de operación de separación de fluidos representada por membranas de separación de polímeros. Porque la tecnología de separación por membrana tiene muchas ventajas que otras tecnologías de separación no tienen: la concentración no requiere cambio de fase, el coeficiente de separación es grande, la selectividad de separación es fuerte y no requiere evaporador ni equipo de refrigeración, bajo costo de inversión y bajo consumo de energía; La tecnología de separación por membrana tiene muchas ventajas e importancia, y se usa ampliamente en la industria biológica y alimentaria, la ingeniería ambiental, la industria farmacéutica y muchos otros aspectos. La tecnología de separación por membrana utiliza una membrana semipermeable como capa de barrera selectiva. Hay una cierta cantidad de diferencia de energía en ambos lados de la membrana como fuerza impulsora, lo que permite que algunos componentes pasen mientras se retienen otros componentes en la mezcla, y la migración de cada componente a través de la membrana. Es una tecnología que logra el propósito de separación con diferentes velocidades; la membrana es un material con función de separación selectiva, y la separación selectiva de la membrana se utiliza para lograr la separación, purificación y concentración de diferentes componentes del líquido de alimentación. Se diferencia de la filtración tradicional en que la membrana puede separarse en el rango molecular y este proceso es un proceso físico que no requiere cambio de fase ni la adición de aditivos. El tamaño de los poros de la membrana es generalmente de micras. Membranas de ultrafiltración, membranas de nanofiltración y membranas de ósmosis inversa; Según los diferentes materiales, se pueden dividir en membranas inorgánicas y membranas orgánicas. Las membranas inorgánicas son principalmente membranas cerámicas y membranas metálicas, que tienen baja precisión de filtración y baja selectividad.

La ultrafiltración es un proceso de membrana entre la microfiltración y la nanofiltración. El tamaño de los poros de la membrana está entre 0,05 y 1000 μm. La ultrafiltración es una tecnología de separación por membrana que puede purificar, separar y concentrar soluciones. La diferencia de presión en ambos lados de la membrana es la fuerza impulsora y la membrana de ultrafiltración se utiliza como medio filtrante. Bajo una cierta presión, cuando el agua fluye a través de la superficie de la membrana, solo se permite el paso del agua y de pequeñas sustancias moleculares más pequeñas que el tamaño de los poros de la membrana para lograr los fines de purificación, separación y concentración de la solución. La microfiltración pertenece a la filtración de precisión. El principio básico es el proceso de separación por tamiz. El ámbito de aplicación de la membrana de microfiltración es principalmente interceptar partículas, bacterias y otros contaminantes de la fase gaseosa y líquida, para lograr el propósito de purificación, separación y concentración. La nanofiltración es una tecnología de separación por membrana entre ultrafiltración y ósmosis inversa. Su límite de peso molecular está en el rango de 80-1000 Da y el tamaño de los poros es de varios nanómetros. Basado en la superioridad de la tecnología de separación por nanofiltración, se usa ampliamente en la industria bioquímica, farmacéutica, alimentaria y muchos otros campos que tienen amplias perspectivas de aplicación.

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